多组蛋白修饰酶的底物
Published: 2016-11-02
Keyword: 多肽修饰
客户文献:Fei Ma. ChemComm. 2016
背景:多组蛋白修饰酶(HMEs)在调控细胞增殖、分化和发育等方面发挥重要作用。因此,高灵敏和高特异性的检测HMEs的方法对研究HME相关的信号通路和生物医学研究非常重要。
结果:本研究开发了一种具有高特异性和高选择性的检测HMEs的方法。该方法整合了基于抗体的荧光标记技术和基于全内反射荧光(TIRF)的单分子检测技术。该方法具有较好的特异性和较高的灵敏度,对组蛋白乙酰转移酶 GcN5的检出限为21 pM,对组蛋白甲基转移酶 G9a的检出限为12 pM。
结论:本方法可用于筛选HME抑制剂和直接检测细胞粗提产物中的HMEs,非常具有潜能可进一步应用于临床诊断和药物开发。
Fig. S5 检测细胞粗提产物中GcN5 (A) 和 G9a (B)的活性
N末端生物素化的多肽底物(biotin-ART KQT ARK STG GKA PRK QLA)和非特异生物素化的多肽底物(biotin-TQL KGT THK CLR SKC LKK RAS)由鸿拓生物技术有限公司(杭州,浙江,中国)合成和纯化。
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