使用一个cELP-SUMO双重融合系统在大肠杆菌中重组生物活性肽先驱体BPP-1的溶解性表达和纯化
Published: 2016-03-24
Keyword: Cell-Penetrating Peptides,多肽修饰,分子动力学,抑制剂
关键词:肽,大肠杆菌,溶解性表达
出版时间:2016-01. Protein Expression and Purification 118 (2016) 113-119.
在一个新型设计的多肽中,一个生物活性肽先驱体 (BPP-1, 14.3 kDa/115AA)可能发挥着潜在的体外抗高血压活性,根据胃肠道蛋白酶的抑制位点其有许多不同抑制ACE肽和抗氧化连接肽组成。
在该研究中通过阳离子弹性多肽和SUMO (cELP-SUMO) 标记研究在大肠杆菌中得到了可溶性BPP-1。在20oC以溶解的形式表达了cELP-SUMO-标记溶解蛋白20h。基于ITC方法纯化该蛋白后,接着通过SUMO蛋白酶依次分解cELP-SUMOeCFPP溶解蛋白以释放成熟的BPP-1。
该研究是第一次在大肠杆菌中使用一个cELP-SUMO标记描述一个溶解性生物活性肽多聚体(其具有潜在的ACE抑制活性和抗氧化功能)。
(A) 编码BPP-1基因片段的设计;(B) cELP和SUMO标记的氨基酸序列。