一般多肽是怎样纯化的
Published: 2016-04-18
Keyword: Cell-Penetrating Peptides,多肽修饰,抗菌肽
纯化一般分为检测和制备。在实验室里我们经常用到的就是交换树脂,毛细管电泳(capillary electrophoresis)(capillary electrophoresis)(capillary electrophoresis)(capillary electrophoresis),高效液相色谱。
多肽纯化一般运用反相柱(如C8,C18等),214nm。缓冲体系一般为含TFA的溶剂,pH2.0。Buffer A为含0.1%TFA in ddH2O,Buffer B为1%TFA/ACN/pH2.0。纯化前用Buffer A溶解;假如溶解不是怎么好,那我们就要用Buffer B溶解后,然后用Buffer A稀释;对疏水性强的多肽,有时还需要参加少数的Formic Acid或醋酸。HPLC剖析多肽粗产品,假如多肽不长(15aa以下),一般会有主峰,主峰一般为全长产品;对于20aa以上的长肽,假如没有主峰,HPLC需调配Mass来断定分子量,进而断定哪个峰是所要合成的多肽。
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